使用高分辨熔解曲线法（HRM）进行基因分型的原理和优缺点
的qPCR体系中加入引物与样本，在qP星空体育 星空体育平台CR程序中扩增至接近饱和（一般30-40循环）后，进行熔解曲线分析（缓慢升温过程中连续记录样本荧光）。
2、解链温度受Mg2+浓度和一些抑制剂影响较大，对样本纯化、加样准确度的要求稍高。
4、速度快，分辨率优于0.02C/点的HRM程序仅需约20分钟完成，相当于其它品牌仪器的普通熔解曲线l体系，比常规方法节省50%-90%的试剂，大幅降低检测成本。
对于某位于人类1号染色体的50bp基因片段，分别使用第25位碱基为C的野生型基因及该位点突变为A,T,G或被删除的突变型基因为模板，使用相同引物及实验条件在q225荧光定量PCR仪上进行高分辨熔解曲线实验。图中所示为不同突变类型模板之间的归一化熔解曲线差值图。
其它说明：1、HRM的引物设计一般需要符合qPCR的引物设计要求，且在满足包含突变位点的要求下扩增片段尽量短。
4、可以通过包含在引物3端包含突变位点的两对或多对引物设计，对不同基因型产生不同的PCR产物（如ARMS PCR或One-step ARMS qPCR）。此方法结合熔解曲线分析，可对SNP取得更好的区分效果。
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