类器官扩增培养（传代）有两种方式：机械性破碎和KemiGel纳米基质胶消化液消化。
两种方式均是将长大的类器官囊泡处理成小的细胞片，将后者重新包埋在KemiGel中，数小时后又可以形成新的较小的类器官。
这些新的类器官在肺类器官培养基中培养2-3星期会逐渐长大，再进行新一轮的传代培养。两种扩增培养方式在扩增培养的过程中可以根据具体的情况灵活运用。
可以运用机械性破碎的方式进行常规的传代，通常2星期传代一次。如果培养中类器官大小过于悬殊，或者后续的实验需要类器官大小均匀，可以用KemiGel纳米基质胶消化液方式进行传代。在做后续分子实验时，与机械性破碎相比星空体育 星空体育平台较，消化液消化后形成的新的类器官DNA、RNA以及蛋白质更容易提取，实验误差小。
1. 用1 ml的枪头吹打孔内的培养基，将KemiGel胶打碎，然后将类器官、培养基及混合在一起的KemiGel转移到15 ml的离心管中，并用500 μl基础培养基收集每个孔内残余的类器官。
2. 300 g离心5 min沉淀类器官，弃上清。然后加入12 ml基础培养基清洗，300 g离心5min，弃上清。
3. 用2 ml基础培养基重悬类器官，再用移液枪反复吹打类器官30次，将类器官囊泡损毁成为细胞片。可吸取少量悬液，在显微镜下观察类器官破碎的程度，判断是否需要继续吹打。碎片化完成后，在类器官悬液中再加入5 ml基础培养基300 g离心5 min，弃上清。然后采用Tryple打散类器官，清洗3次获得单细胞（细胞团）细胞沉淀。
4. 根据离心管底部类器官团块的大小，加入适量的Enhancer重悬类器官，再加入相等体积的KemiGel纳米基质胶混合均匀，切勿引入气泡，保证Enhancer细胞悬液与KemiGel的混合比例为1:1(v/v），通常按类器官现有孔数的2-3倍进行扩大培养。
5. 将KemiGel悬液加入的24孔板中，每个孔300 μl。然后将24孔板小心放入37℃的细胞培养箱中孵育5-10min，KemiGel即固化成胶，此时即可加入类器官培养基（推荐24孔板每孔500 μl）。将孔板置于5% CO2的细胞培养箱37℃孵育培养。
2. 每孔加入500μl KemiGel纳米基质胶消化液后，用1 ml的枪头吹打孔内的胶，将KemiGel胶粒打碎，然后将类器官、消化液及混合在一起的KemiGel纳转移到15 ml的离心管中，并用500 μl消化液将每个孔内残余的类器官再清洗一遍。
3. 然后加入4ml 消化液，37℃孵育5-10min后，用移液枪反复吹打类器官（30次），在显微镜下检查类器官碎片大小。加入5 ml PBS终止消化，300 g 离心5min，弃上清。然后采用Tryple打散类器官，清洗3次获得单细胞（细胞团）细胞沉淀。
4. 根据离心管底部类器官团块的大小，加入适量的Enhancer重悬类器官，再加入相等体积的KemiGel纳米基质胶混合均匀，切勿引入气泡，保证Enhancer细胞悬液与KemiGel的混合比例为1:1(v/v），通常按类器官现有孔数的2-3倍进行扩增培养。
5. 将KemiGel悬液加入的24孔板中，每个孔300 μl。然后将24孔板小心放入37℃的细胞培养箱中孵育5-10min，KemiGel即固化成胶，此时即可加入类器官培养基（推荐24孔板每孔500 μl）。将孔板置于5% CO2的细胞培养箱37℃孵育培养。