神经营养因子受体络氨酸激酶（NTRK）基因融合突变，广泛分布于不同类型实体瘤中，是泛肿瘤靶向治疗重要的靶点。近年来，针对这一靶点星空体育 星空体育平台的研究备受临床关注，也获得了诸多突破。
研究表明，利用扩增染色方案和推荐的cutoff值，pan-TRK免疫组化（IHC）检测显示出高灵敏度，同时保持良好的特异性和准确性，提高了对实体瘤NTRK 融合突变的筛选和富集效率。该研究为IHC检测用于实体瘤NTRK融合突变阳性患者的筛查提供了关键的数据支持，并有望为中国乃至全球NTRK融合突变IHC检测建立新的标准。
NTRK基因融合突变已被确定为泛实体瘤成人和儿童患者的致癌驱动因素，虽然在实体瘤的整体发病率仅为0.3%[1]，但考虑实体瘤患者的庞大数量，NTRK基因融合突变阳性患者的绝对数量并不少。并且，阳性患者可以在靶向治疗中显著获益，数据显示中国人群的客观缓解率达81%[2]。鉴于NTRK基因融合的罕见性，治疗的关键问题是如何以经济高效的方式找到阳性患者。
现阶段，NTRK融合突变的检测方法主要包括免疫组织化学法（IHC）、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、荧光原位杂交（FISH）和二代测序（NGS）方法学。相较而言，IHC方法检测NTRK融合具有高灵敏度、低成本和易开展等特点，更适合用于筛查富集潜在阳性患者。早在2019年，就有相关产品（VENTANA pan-TRK星空体育 星空体育平台 (EPR17341)检测试剂）获得国家药品监督管理局(NMPA)批准上市。ESMO（欧洲肿瘤内科学会）指南中推荐使用IHC方法筛查富集、再使用NGS进行确认的策略寻找阳性患者[3]。《中国实体瘤NTRK融合基因临床诊疗专家共识》也指出：pan-TRK IHC可以作为NTRK融合突变发生率较低、常规条件下不推荐NGS DNA panel方法的癌种初筛方法；也可以作为NGS检测方法的复核手段。
NTRK融合突变广泛分布于不同实体肿瘤类型中，融合伴侣的多样性及免疫组化染色模式的复杂性，给pan-TRK IHC检测和判读标准的建立带来极大的障碍。目前国内外尚无成熟可靠的判读标准，临床实践中应用的IHC染色方案和cutoff值均不理想，导致IHC检测筛查性能有限，这些不足都限制了pan-TRK IHC检测在临床的广泛应用。该研究旨在优化IHC染色方案并重新定义cutoff值，以提高pan-TRK IHC检测方法筛查NTRK融合突变的效果。
该研究从中国 12 家医院回顾性收集了126例NTRK+和162例NTRK-实体瘤样本（在目前国内外所有已发表的相关研究中，本研究阳性样本是最多的），这些样本先前均已经NGS和/或FISH 检测确认。所有样本均使用VENTANA pan-TRK IHC试剂检测，并分别用两种不同的IHC染色方案：1）VENTANA pan-TRK IHC 试剂说明书中推荐的传统方法；2）扩增方法，即在传统方法基础上增加扩增步骤以增强染色。根据试剂厂商的说明对经IHC染色的样本进行判读，并分析结果以计算 cutoff值。基于计算的cutoff值和文献报道的cutoff值，分别计算灵敏度、特异性、准确性、阳性预测值（PPV）和阴性预测值（NPV）。
该研究126例 NTRK+样本中，包含25种融合伴侣类型和23种肿瘤类型。IHC检测显示有35例NTRK-样本未染色，253例样本着色（126NTRK+/127NTRK-）。肿瘤细胞染色主要位于细胞质和细胞核位置（132 例细胞质阳性，105例细胞质和核阳性）。由于膜染色的样本有限，仅定义了细胞质和细胞核染色的cutoff值。为了增强pan-TRK IHC检测在NTRK融合突变筛查中的敏感性和可操作性，研究对直接统计计算的cutoff值进行了调整，并推荐在临床实践中使用以下cutoff值：
研究结果表明，利用扩增染色方案和推荐的cutoff值，pan-TRK IHC检测显示出高灵敏度，同时保持良好的特异性和准确性，提高了对实体瘤NTRK 融合突变的筛选和富集效率。该研究为IHC检测用于实体瘤NTRK融合突变阳性患者的筛查提供了关键的数据支持。基于该研究建立的pan-TRK IHC染色判读标准，为中国及全球其它国家临床实践的开展提供了可靠的参考标准。