荧光定量实验数据分析ppt
在样品制备过程中,加入已知的阴性样品(或水),并将提取物作为模板加入反应体系,参与整个实验过程。
大量引物二聚体的形成使得引物很快消耗完,从而造成扩增曲线的平台期很低。
虽然我们可以认为这些样品是临界阳性,但是对这些样品的定量结果都是不太准确的。
形成这类曲线的原因可能是模板的质量差 (RT / PCR抑制物; 模板浓度低), 也可能是引物探针的设计问题。
如果使用的试剂背景信号太强,荧光的增星空体育官方入口 星空体育官网inwo.com target=_blank>星空体育官方入口 星空体育官网长将会很小,导致扩增曲线的指数增长期会变得很短,或者没有。
查看扩增曲线的形状:是否有明显扩增阶段(指数增长期)? 指数图下扩增曲线间是否平行?
