DNA溶解曲线表示扩增产物的特异性。 曲线横坐标是温度，每个温度点一个。一般从60到98度纵坐标是荧光强度的变化值（不是强度本身）。 一开始加热的时候，虽然荧光强度比较强，但是由于双链没有解离，所以荧光强度保持不变。 当加热接近于PCR产物Tm时，双链开始解离，荧光强度变小，机器会比较前后2个温度点的荧光强度，然后把2者的差值标在图上。 Tm到达时，有一般双链解离，这时的荧光强度变化最大（峰值）。再加热，双链全部解离，所以荧光强度的变化又变小了。 你PCR产物大小不一，但是只要有相同或者相近的Tm，峰值星空体育登录入口 星空体育在线官网就有可能在一个位置上。如果实际测得的峰值和理论计算的吻合，问题不大。如果有差别，说明有非特异性产物，建议不要再用SYBR GREEN方法。 标准的PCR过程分为三步：?? 1.DNA变性? ??（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，?氢键断裂，形成单链DNA? ?2.退火? ??（25℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。? ?3.延伸? ??（70℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dNTP为原料，从引物的5′端→3′端延伸，合成与模板互补的DNA链。?? ??每一循环经过变性、退火和延伸，DNA含量即增加一倍。 1、随着温度的升高，DNA双链断裂；接着温度降低，到达退火温度的时候，DNA双链复性，荧光分子绑定在DNA双链上，所以荧光信号值到达最高
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