MTT法观察细胞生长曲线doc
7. MTT溶液：称取250mgMTT，放入小烧杯中，加50ml培育液或平衡盐溶液在电磁力搅拌机上搅拌30min，，分装，4℃保存备用，两周内有效。
RPMI1640培育液配成单个细胞悬液，以每孔103～104个细胞接种于96孔培育板中，每孔体积200ul。
2. 培育细胞：将培育板移入CO2孵箱中，在37℃、5% CO2及饱和湿度条件下培育。（培育时间取决于试验目的和要求）
3. 呈色：每孔参加MTT溶液（5mg/ml）20ul，37℃孵箱中连续孵育4h，终止培育，当心吸弃孔内培育上清液。对于悬浮生长的细胞，需离心（1000rpm，5min），然后弃去孔内培育液。每孔参加150ul DMSO，振荡10min，使结晶物充分溶解。
4. 比色：选择490nm波长，在酶联免疫检测仪上测定各孔光汲取值，记录结果。以时间为横轴，光汲取值为终轴绘制细胞生长曲线。
1． 选择适当的细胞接种浓度。在进展MTT试验前，对每一种细胞都应测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，然后确定试验中每孔的接种细胞数和培育时间。
3． 设空白对比，与试验平星空体育网站 星空体育首页行设不加细胞只加培育液的空白对比孔。最终比色时，以空白孔调零。
四唑蓝(MTT)法测定细胞生长曲线及生长速度：MTT法绘制3组细胞的生长曲线，分别将细胞用无血清培育液配制成单细胞悬液,计数后接种于96孔板(1104)/孔，设立空白组培育7 d,每天每组细胞各取6孔, g/L,37℃连续培育4 h,弃去培育上清液,每孔参加