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　　gRNA设在外显子2两端的内含子中，敲除外显子编码碱基数为非3倍数，敲除后可造成移码。

　　根据细胞特性，选择适合的转染方式将gRNA和Cas9转入细胞后进行药筛，经靶位点扩增及测序验证，筛选出基因敲除的阳性纯合子。