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人CD28分子(CD28)ELISA试剂盒|茁彩生物
发布:2026-01-19 19:45:56 浏览:

  CD28分子(Cluster of Differentiation 28)是免疫细胞表面的关键共刺激分子,属于免疫球蛋白超家族成员,其编码基因位于人类2号染色体2q33区域,又称Tp44或IMD123。作为T细胞活化的“第二信号”核心介质,CD28分子在调控适应性免疫应答、维持免疫稳态及参与疾病发生发展中发挥不可替代的作用,同时星空体育登录入口 星空体育在线官网也是肿瘤免疫治疗、自身免疫病干预等领域的重要靶点。

  T细胞的完全活化依赖“双信号”模式:第一信号由T细胞受体(TCR)与APC表面的抗原-MHC复合物结合提供,第二信号则主要由CD28与CD80/CD86的相互作用介导。缺少CD28共刺激信号时,T细胞会进入无反应状态(失能)或发生凋亡,无法有效启动免疫应答。

  CD28分子与配体结合后,通过胞内区信号模体启动多条下游信号通路,核心功能包括:

  :通过激活PI3K/Akt通路和mTOR通路,促进IL-2(白细胞介素-2)等细胞因子的表达与分泌,同时上调抗凋亡蛋白Bcl-xl的表达,降低T细胞对凋亡的敏感性,推动T细胞进入细胞周期并持续增殖;

  :通过PI3K/Akt通路促进葡萄糖摄取,提升T细胞代谢效率,为细胞增殖、细胞因子产生等耗能过程提供能量支持;

  :激活CARMA1/NF-κB、NFAT等转录因子通路,促进IL-2、IFN-γ、IL-4等多种促炎细胞因子和免疫调节因子的产生,强化T细胞的效应功能;

  :通过调控Rela依赖的信号通路,参与调节性T细胞(Treg)的生成,同时影响T细胞向Th1、Th2等亚群的分化方向。

  近期研究还揭示了CD28信星空体育登录入口 星空体育在线官网号的TCR依赖性调控机制:静息状态下,CD28胞内区的碱性氨基酸富集区通过静电相互作用与细胞膜内层的酸性磷脂结合,屏蔽活性位点,避免与下游分子自动结合;当TCR识别抗原引发初始激活后,会诱发Ca²⁺内流并在CD28周围富集,Ca²⁺通过静电竞争打破CD28与酸性磷脂的相互作用,解除屏蔽并激活CD28信号——这种TCR-Ca²⁺-CD28正反馈环路可迅速放大抗原刺激信号,显著提高T细胞的抗原响应敏感性。

  人 CD28 分子(CD28)ELISA 试剂盒的检测核心基于抗原 - 抗体特异性结合与酶催化显色的协同作用,主流采用双抗体夹心法。具体原理如下:

  ELISA 技术的核心是抗原或抗体的固相化及酶标记修饰:包被于固相载体(酶标板)的抗体 / 抗原仍保留免疫学活性,酶标记的抗体 / 抗原则同时具备免疫学活性和酶催化活性,通过洗涤分离未结合成分,最终利用酶对底物的高效催化作用放大检测信号,实现对目标分子的定性与定量分析。

  固相包被:试剂盒预制的酶标板孔内已包被抗人 CD28 特异性抗体(捕获抗体),可特异性结合样本中的 CD28 抗原。

  抗原捕获:加入待检测样本(或标准品)后,样本中的 CD28 抗原会与酶标板上的捕获抗体特异性结合,形成 “固相抗体 - 抗原” 复合物;洗涤步骤可去除未结合的杂蛋白等干扰成分。

  夹心复合物形成:加入酶标记的抗人 CD28 检测抗体(或生物素化检测抗体 + 酶标记亲和素复合物),该抗体可结合 CD28 抗原上与捕获抗体不同的表位,最终形成 “捕获抗体 - CD28 抗原 - 检测抗体 - 酶” 的稳定夹心复合物。

  显色与信号关联:加入显色底物(如 TMB)后,复合物中的酶(常用辣根过氧化物酶 HRP)会催化底物发生显色反应,生成蓝色产物;加入终止液后,产物变为黄色。通过酶标仪在特定波长(通常 450nm,部分需参考 630nm 背景值)测定吸光度(OD 值),CD28 抗原浓度与 OD 值呈正相关,结合标准曲线即可计算出样本中 CD28 的具体浓度。