大规模体外培养扩增高质量的间充质干细胞(MSC),是干细胞企业所追求的。那么建立合适的培养体系就显得非常重要,而培养基是重中之重。
相信有些干细胞企业都有属于自己的培养基专利,但是拥有专利不等于这个专利能培养出高质量的MSC。培养基配方稍加改动,就可以产生新的专利,而且专利的本质不在于追求培养出高品质的MSC。
比如有实验室培养MSC到第9代已经出现80%的衰老(SA-gal染色阳性),而有的实验室培养到第11代也只是40%的MSC出现衰老。有的实验室骨髓MSC只能扩增到第10代,脐带、脐带血、羊膜来源的MSC也只能扩增到12-14代。但也有实验室能做到脐带MSC的培养能有效扩增到40代,依然具有多向分化潜能。可见不同实验室的培养体系对MSC的扩增效能有明显的差异。
MSC的体外扩增培养,不可避免地出现复制衰老(replicative senescence),过度扩增还可能伴随着基因组的不稳定性,影响到MSC的干细胞功能。相对于小鼠的MSC,人MSC的基因组稳定性比较好,而且不具有成瘤性。
那么MSC细胞衰老的最直星空体育登录入口 星空体育在线官网观表现有哪些?增殖速度减慢和胞体变大扁宽是所有细胞衰老的特征。
细胞核型分析显示,骨髓MSC在培养至18代的时候出现了染色体异常和端粒酶缩短,而脐带MSC在培养至30代才会出现染色体异常。但是一般都会应用10代前的MSC,所以不用担心染色体异常的星空体育登录入口 星空体育在线官网问题。
基础培养有DMEM、DF-12、αMEM、IMDM等。不同基础培养对MSC大规模扩增有没有影响?目前这方面的研究极少。
胎牛血清(FBS)是研究实验室中最常见的培养补充液。有专家认为胎牛血清有几个劣势:成本高、批次变异(产生
