• 又因为在SPSS中的曲线拟合功能选项中并没有 的 Y a 2b t 函数拟合模型,只有 Y a eb t • 于是我们可以通过变换
• 细胞群体倍增时间的计算方法有2种。 • 1.做图法:在细胞生长曲线的对数生 长期找出细胞增加一倍所需的时间, 即倍增时间, • 2.公式法,按细胞倍增时间计算细胞 群体倍培时间,其为公式为:
1.MTT比色法测定细胞生长曲线.细胞生长曲线拟合及细胞群体 倍增时间的简化计算
• 细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法,也 是判定细胞活力的重要指标,是培养细胞生物学特性 的基本参数之一。
• 例如:用培养液将待检细胞制成 1×10^4/ml的细胞悬液;分别接种于多块96孔 板 ,每孔 100μl ;在 24、 48、 72、 96及 120 h时间点取一块 96孔板 ,采用 MTT法测 量吸光值A值得到吸光值A值与时间的关系。 根据标准曲线计算出相应的细胞数 ,再绘 出细胞的生长曲线。
• • (1)传代后把细胞重悬,得到细胞悬液,把悬液均匀加到24孔板中 (2)24 h后开始进行细胞计数,以后每隔24 h计数一次,每次取4孔细胞, 分别进行计数,计数结果取4孔的平均值。连续计数6天。 • (3)根据细胞计数结果,以单位细胞数(细胞数/mL)为纵坐标,以时间为 横坐标绘制生长曲线孔板 细胞计数板
活细胞的线粒体中琥珀酸脱氢酶能星空体育网站 星空体育首页够使外源性 的MTT还原,同时在细胞色素C 的作用下,生成不 溶于水的蓝色(或蓝紫色)络合物甲臜。 • 按照时间间隔,通过酶联免疫检测仪在490nm (或570nm)波长处测定甲臜 的光吸收值(A值)。 • 在通常情况下,甲臜生成量与活细胞数成正比, 因此可根据光吸收值推算出活细胞的数目。 • 由于死细胞中不含琥珀酸脱氢酶,因此加入 MTT 不会有反应。 • 4/2/2019
• 曲线拟合(curve fitting)是指选择适当的曲线类 型来拟合观测数据,并用拟合的曲线方程分析两 变量间的关系。
• SPSS是世界上最早的统计分析软件,由美国斯坦 福大学的三位研究生Norman H. Nie、C. Hadlai (Tex) Hull 和 Dale H. Bent于1968年研开发成功, 同时成立了SPSS公司,并于1975年成立法人组织、 在芝加哥组建了星空体育网站 星空体育首页SPSS总部。 • 1984年SPSS总部首先推出了世界上第一个统计分 析软件微机版本SPSS/PC,开创了SPSS微机系列 产品的开发方向,极大地扩充了它的应用范围, 并使其能很快地应用于自然科学、技术科学、社 4/2/2019
一般细胞传代之后,经过短暂的 悬浮然后贴壁,随后度过长短不同 的迟缓期(潜伏期),即进入大量 分裂的对数生长期。在细胞达到饱 和密度后,停止生长,进入稳定期, 然后退化衰亡。
• (Nt为对数生长期任一点的理论观 察值,N0为对数生长期理论初始值) • 计算比较复杂,而我们基于以往曲线 进行理论推导而行的理论倍增时间, 计算相对简单。
