4、每孔加入10μL CCK溶液（注意不要再孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。
实验目的：检测SRT-1720/EX527刺激293T细胞后对细胞增殖的影响
1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞至96孔板。
2、设置4个细胞浓度梯度：0，2000，4000，8000，每组4个复孔。
SRT-1720,EX527一定要应用在白血病细胞株星空体育 星空体育平台起作用的浓度方可比较对293T细胞和白血病细胞株的不同影响，请重复实验。
图二、3um SRT1720刺激293T细胞后的细胞增殖曲线。该曲线呈S形，符合细胞正常生长情况。
图三、100um EX527刺激293T细胞后的细胞增殖曲线。该曲线前部分呈S形，符合细胞正常生长情况，但在进入对数期之后曲线有下滑，之后进入平台期。
SRT1720为SIRT1特异性活化剂，在前期实验中对白血病细胞株的生长表现出抑制作用，此次实验中SRT1720对正常细胞（293T）的生长无明显抑制作用。暗示SIRT1的活化对正常细胞的生长可能无明显影响。
小剂量EX527为SIRT1特异性抑制剂，在前期实验中大剂量EX527对白血病细胞株的生长表现出抑制作用，而小剂量EX527无此效应，此次实验中大剂量EX527对正常细胞（293T）的生长可能有轻度抑制作用。但不能以一次实验结果做出肯定的结论，该实验还需重复。
3、接种后培养24小时使细胞贴壁，然后加CCK试剂培养4小时后测定OD值，制作出一条以细胞数量星空体育 星空体育平台为横坐标（X轴），OD值为纵坐标（Y轴）的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量（试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间。）