【提要】本研究通过在普通培养液中加入 一定浓度的 P HA(植物凝集素 )改善 TI L细胞的培养体 系 , 延长其培养时间 , 使 TIL细胞在体外大 量扩增 ,这 种扩增后的 TI L细胞与 常规培养的 TIL细胞 在小鼠体内具有相同的抗肿瘤作用 。这项研 究为临床上更多获取 T星空体育网站 星空体育首页IL细胞进行了有意义的探索。
小鼠宫颈癌细胞 ( U14 ) ,从上海复旦大学 遗传所引进。该细胞在小鼠体内具有稳定的 成瘤性及转移性。 1. 3小鼠的免疫及淋巴细胞的制备 [2 ]
2. 2实验性扩增后 TIL细胞的抗肿瘤作用 用游标卡尺测量肿瘤大小及病理切片观
察证实 ,经实验性扩增的 TIL细胞具有明显 的抗肿瘤作用。 (附表 )
袁铿汪泱江紫生袁芳江全 (江西省医学科学研究所抗肿瘤室南昌 330006)
本实验表明 ,少量的小鼠 TIL细胞在含 有 PHA的培养体系刺激下能够被激活和大 量扩增 ,并能较稳定地增殖 15 d以上。经过 种培养体系扩增的 TIL细胞与常规方法激 活的 TIL细胞具有同样的抗肿瘤效应。我们 在实验中还观察到 ,单纯 IL- 2激活的 TIL 细胞在 3～ 7 d左右成倍增殖 ,但 10 d以后开 始衰亡 , 而加了 PHA培养体系中的细 胞不 断增殖 ,而且存活时间长 ,这可能是由于 P HA的刺激作用。至于细胞扩增机理及扩增 后 IL- 2受体的表达 , TIL的活性等有待进 一步研究。总之 ,通过改善 TIL细胞的培养 体系获得更多的具有抗肿瘤效应的 TIL细 胞 ,无疑为肿瘤的过继免疫治疗提供了一个 更加方便的途径。
同时 ,在病理切片中我们可以看到经实 验性扩增后 TIL细胞治疗的肿瘤切片为: 癌
组织中央坏死 ,癌组织周围有大量的淋巴细 胞浸润 ,这与常规培养的 TIL细胞治疗后的 切片结果是一致的 ,说明癌细胞的扩散受到 了一定的限制。而对照组病理切片显示: 癌组 织广泛坏死 ,癌组织周围血管充血 ,水肿有少 量淋巴细胞浸润 ,说明趋向恶化。
007)分离出淋巴细胞 ,洗涤三遍计数备用。 1. 4 TIL细胞的培养与扩增 [3 ]
2. 1 TIL细胞增殖动力学 特殊培养体系中 TIL细胞传代至 15 d
后 ,细胞数量扩增数十倍。平均传代周期 3～ 4 d。第七代后仍有扩增能力 ,因实验完成而 终止培养。常规培养的 T IL细胞亦有扩增现 象 ,但第 10 d左右开始衰亡 ,死细胞逐渐增 多于第 15 d终止培养。 (附图 )
关键词: 肿瘤浸润淋巴细胞体外扩增肿瘤 /治疗 中图号: R 392- 33
肿瘤浸润的淋巴细胞 ( TIL细胞 )的杀伤 作用显著 [1 ]。为了富集这种细胞 ,我们通过改 善 TIL细胞的培养体系与延长体外培养的 时间 ,使其大量扩增 ,并在荷瘤小鼠体内证实 了这种扩增后的 T IL细胞的抗肿瘤作用。