细胞生物学研究方法; 细胞分离和细胞培养;一、细胞分离（ cell separation）;;B. 细胞的黏附性;D. 流式细胞仪(flowcytometer,FCM);E. 激光捕捉显微切割技术(LCM); 其原理是用乙烯醋酸盐聚合体膜覆盖在被选择的细胞上，然后用红外激光熔化膜，这时膜与组织在目标位置牢固结合，当膜被提起时，仅目标细胞留在膜上，这些细胞直接在膜上进行裂解,再进行2DE分离及蛋白质组分析或用 SELDIT0F进行分离与分析。;二、细胞培养 （Cell culture）;1.细胞培养的条件;2.细胞培养的不同阶段;原代培养(primary culture):直接从生物体获取细胞进行培养。 传代培养(secondary culture):将原代培养的细胞连续以一定比例扩大培养。 细胞系(cell line):原代培养细胞成功传代即为细胞系。 细胞株(cell strain):从培养细胞中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群。;功能：保持原分化特性 形态：多不保持原有细胞形态 ; 可无限增殖、传代 细胞系（NIH3T3: 1963年由小鼠成纤维细胞建立） 接触抑制:细胞系在固体表面生长繁殖,在互相接触后,即培养皿长满一单层细胞后停止分裂、增殖。;特点: 可在培养皿中以极高的密度增殖， 没有扩展的余地时,可向空间生长。;3.细胞克隆（Cell cloning）;思考题;谢谢！
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