树突状细胞（Dendritic cells DCs）DC细胞是目前抗原提呈能力最强的细胞，它在机体免疫过程中发挥着重要作用，DC细胞通过将特异性抗原提呈给T细胞能够诱导抗原特异性T细胞的大量增殖从而清除携带特异抗原特征的病原体(肿瘤细胞或者病毒等)以达到治疗疾病的目的。 传统从单个核细胞诱导的DC细胞的方法被认为DC细胞在数量上是不能增殖的，从100ml的外周血中大约获得10^7左右的DC细胞，这个数量对于DC细胞发挥临床治疗效果是远远不够的。DC细胞数量的不足严重制约了基于DC细胞的临床研究和应用的开展。
2）DC培养基添加剂溶解完全后，轻轻摇晃瓶身，使其温度与成份均一，摇晃时，请小心避免气泡产生，解冻时，若有蛋白沉淀产生属于正常现象，若该沉淀影响观测，可通过离心或0.22um滤器过滤去除。
2 第0天，取5x107MNC细胞，用100ml DC细胞扩增完全培养基重悬，平均转入2个细胞培养袋中，每袋50ml含2.5x107MNC细胞，置于37℃、5%CO2培养箱；
2）转袋结束后，细胞培养袋平放于培养箱中，置于培养箱培养期间切勿移动细胞培养袋以利于细胞贴壁。
3第4-5天，再次配置DC细胞扩增完全培养基100ml （含90ml DC培养基，10mlDC培养基添加剂，60μL的DC-A，50μL的DC-B，100μL的DC-C，100μL的DC-D），平均转移入2个培养袋中，此时每个培养袋中液体体积为100ml。
2) 此时可以观察到有少部分细胞黏附于细胞袋底部，移动培养袋时注意动作轻柔，不可剧烈晃
4第9-10天，再次配置DC细胞扩增完全培养基200ml（含180ml DC培养基，20mlDC培养基添加剂，120μL的DC-A，100μL的DC-B），平均转移入2个培养袋中，此时每个培养袋中液体体积为200ml。
2）此时可以观察到黏附于细胞袋底部细胞较前增多，移动培养袋时仍然需要注意动作轻柔，不可剧烈晃动。
5第14-15天，再次配置DC细胞扩增完全培养基200ml（含180ml DC培养基，20mlDC培养基添加剂，120μL的DC-A，100μL的DC-B），转移入培养袋中，此时培养袋中液体为300ml。
此时可以观察到大量细胞黏附于细胞袋底部，移动培养袋时仍然需要注意动作轻柔，不可剧烈晃动。
6 第20天，再次配置DC细胞扩增完全培养基100ml（含90ml DC扩增培养基，10mlDC扩增添加剂，60μL的DC-A，50μL的DC-B），转移星空体育网站 星空体育首页入培养袋中，此时培养袋中液体为350ml。
1）此时可以观察到大量细胞黏附于细胞袋底部，移动培养袋时仍然需要注意动作轻柔，不可剧烈晃动；
8第25天,晃动培养袋，直到所有细胞从培养袋底部脱落，收集细胞于离心管中，300g 10min洗涤，去上清。使用PBS重复洗涤一次，计数。
此时可以观察到大量细胞黏附于细胞培养袋底部，；可持续晃动后至几乎所有细胞从培养袋底部脱落。
9 第25天,收获细胞以2x106/ml使用步骤7配置好的培养基铺于T-175瓶中，建议铺瓶体积为100ml/瓶，继续置于37℃、5%CO2培养箱；