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一种TIL细胞体外扩增培养基组合和培养方法技术
发布:2025-06-21 09:16:11 浏览:

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  本公开涉及一种TIL细胞体外扩增培养基组合,包括诱导培养基、增殖培养基和活化适应培养基;所述诱导培养基的组成成分包括:基础培养基、灭活动物血清、香菇多糖、黄芪多糖、党参多糖和枸杞多糖;所述增殖培养基的组成成分包括:基础培养基、灭活动物血清、白细胞介素和单克隆抗体;所述活化适应培养基包括:基础培养基、胰岛素、转铁蛋白和谷氨酰胺。通过上述技术方案,利用本公开所提供的TIL细胞体外扩增培养基组合和方法培养获得的TIL细胞数量更多,在临床治疗中也具有更高的靶细胞杀伤活性。

  肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)是浸润于肿瘤组织中以肿瘤抗原特异性CD4+、CD8+T细胞为主,同时包括B细胞和NK细胞的细胞群。因TIL与肿瘤细胞密切接触,理论上可以对肿瘤细胞产生特异性的杀伤作用。TIL疗法是一种肿瘤特异性的细胞免疫疗法,将体外培养增殖后的TIL回输到体内,其在血液及肿瘤中可以长时间存活并行使杀伤功能。该方法具有高效、特异、副作用小等优点,可应用于实体瘤和各类晚期癌性胸、腹水患者的治疗。目前临床应用的TIL的来源主要有两个方面:1、手术切除的肿瘤组织或淋巴结;2、癌性胸腹水。常规的TIL细胞培养方法受肿瘤大小、肿瘤浸润程度以及胸腹水量等诸多因素的限制,细胞在培养过程中的增殖速度慢、增殖倍率低,培养获得的细胞往往杀伤活性较差从而不能满足临床治疗的要求。此外,由于TIL不仅包含肿瘤杀伤性CD8+T细胞(CTL),而且还包含抑制CTL抗肿瘤功能的调节型CD4+CD25+T细胞(Treg细胞)和髓系衍生抑制细胞(MDSC)。现有的TIL细胞扩增

一种TIL细胞体外扩增培养基组合和培养方法技术(图1)

  一种TIL细胞体外扩增培养基组合,包括诱导培养基、增殖培养基和活化适应培养基;所述诱导培养基的组成成分包括:基础培养基、灭活动物血清、香菇多糖、黄芪多糖、党参多糖和枸杞多糖;所述增殖培养基的组成成分包括:基础培养基、灭活动物血清、白细胞介素和单克隆抗体;所述活化适应培养基包括:基础培养基、胰岛素、转铁蛋白和谷氨酰胺。

  1.一种TIL细胞体外扩增培养基组合,包括诱导培养基、增殖培养基和活化适应培养基;所述诱导培养基的组成成分包括:基础培养基、灭活动物血清、香菇多糖、黄芪多糖、党参多糖和枸杞多糖;所述增殖培养基的组成成分包括:基础培养基、灭活动物血清、白细胞介素和单克隆抗体;所述活化适应培养基包括:基础培养基、胰岛素、转铁蛋白和谷氨酰胺。2.根据权利要求1所述的培养基组合,其中,所述白细胞介素为IL-7、IL-12和IL-15中的至少一种。3.根据权利要求2所述的培养基组合,其特征在于,所述白细胞介素为IL-7、IL-12和IL-15。4.根据权利要求1-3中任意一项所述的培养基组合,其中,所述单克隆抗体为CD3单克隆抗体、CD134单克隆抗体和PD-1单克隆抗体中的至少一种。5.根据权利要求4所述的培养基组合,其中,所述基础培养基为AIM-V培养基和RPMI-1640培养基中的至少一种,所述灭活动物血清为胎牛血清。6.根据权利要求1-3和5所述的培养基组合,其中,所述诱导培养基包括以下含量的各组分:香菇多糖20-50μg/mL、黄芪多糖20-50μg/mL、党参多糖20-50μg/mL、枸杞多糖20-50μg/星空体育登录入口 星空体育在线官网mL、体积百分含量为5-10%的胎牛血清;AIM-V培养基与RPMI-1640培养基的体积比为1:1-1.4。7.根据权利要求6所述的培养基组合,其中,所述增殖培养基包括以下含量的各组分:IL-75-15ng/mL、IL-125-15ng/mL、IL-155-15ng/mL、CD3单克隆抗体10-30ng/mL、CD134单克隆抗体10-30ng/mL、PD-1单克隆抗体10-30ng/mL、体积百分含量为5-10%的胎牛血清;AIM-V培养基与RPMI-1...