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本发明专利技术公开了一种表皮细胞的扩增制备方法，按照如下步骤进行：无菌条件下将包皮环切手术切下的包皮洗涤并剪碎，去除皮下星空体育登录入口 星空体育在线官网组织后，将表皮和真皮分离，之后加入胰蛋白酶‑EDTA溶液中消化一定时间后，离心并弃上清液，并将得到的表皮细胞群接种于培养瓶内，置于培养箱中培养；接种3d后第一次换液，以后每隔2d换液一次，12‑14d后终止培养。通过在基础培养液中加入胰岛素，转铁蛋白，生长激素与视黄酸，其中，胰岛素可以促进表皮组织中DNA的合成，转铁蛋白可以控制体液中自由铁的平衡，视黄酸有控制表皮细胞正常生长分化的能力，并可抑制多种致癌因素诱发的体外培养细胞的恶性转化，所配置的培养液对表皮细胞的体外培养具有促进作用。
皮肤由表皮、真皮和皮下组织组成,是人体最大最复杂的器官,具有保护、分泌、感知和代谢功能。皮肤缺损是一种常见的组织损伤性疾病。对于大面积深度烧伤的治疗一直以自体皮移植为首选方案,然而自体供皮不足是临床遇到的主要问题。虽可应用异体皮、异种皮移植物,但只能作为一种临时性创面覆盖物。因此人们一直在寻找一种永久性皮肤替代物,而永久性皮肤替代物仍依赖于有活性的种子细胞(表皮细胞和成纤维细胞)。至今，成纤维细胞的培养技术已经日臻完善,但表皮细胞的培养仍然是一个难题。
本专利技术的目的在于提供一种表皮细胞的扩增制备方法，通过在基础培养液中加入胰岛素，转铁蛋白，生长激素与视黄酸，确定了一种无血清培养表皮细胞的培养方法。本专利技术是通过以下技术方案实现的：一种表皮细胞的扩增制备方法，按照如下步骤进行：步骤(1)、配置表皮细胞培养液；步骤(2)、无菌条件下将包皮环切手术切下的包皮洗涤并剪碎；步骤(3)、将所述步骤(2)中剪碎的包皮组织块修剪去除皮下组织后，剪碎并将表皮和真皮分离；将分离后的表皮组织加入胰蛋白酶-E
一种表皮细胞的扩增制备方法，其特征在于按照如下步骤进行：步骤(1)、配置表皮细胞培养液；步骤(2)、无菌条件下将包皮环切手术切下的包皮洗涤并剪碎；步骤(3)、将所述步骤(2)中剪碎的包皮组织块修剪去除皮下组织后，剪碎并将表皮和真皮分离；将分离后的表皮组织加入胰蛋白酶‑EDTA溶液中消化20‑30min后，加入步骤(1)中配置的表皮细胞培养液终止消化；步骤(4)、将所述步骤(3)中的得到的星空体育登录入口 星空体育在线官网表皮组织悬液离心，弃上清液，得到表皮组织细胞群；步骤(5)、于培养瓶中加入2mL所述步骤(1)中配置的表皮细胞培养液，将所述步骤(4)中得到的表皮组织细胞群以1×105个/mL接种于培养瓶内，静置30‑60mi
1.一种表皮细胞的扩增制备方法，其特征在于按照如下步骤进行：步骤(1)、配置表皮细胞培养液；步骤(2)、无菌条件下将包皮环切手术切下的包皮洗涤并剪碎；步骤(3)、将所述步骤(2)中剪碎的包皮组织块修剪去除皮下组织后，剪碎并将表皮和真皮分离；将分离后的表皮组织加入胰蛋白酶-EDTA溶液中消化20-30min后，加入步骤(1)中配置的表皮细胞培养液终止消化；步骤(4)、将所述步骤(3)中的得到的表皮组织悬液离心，弃上清液，得到表皮组织细胞群；步骤(5)、于培养瓶中加入2mL所述步骤(1)中配置的表皮细胞培养液，将所述步骤(4)中得到的表皮组织细胞群以1×105个/mL接种于培养瓶内，静置30-60min后置于37℃、5％CO2培养箱中培养；接种3d后第一次换液，以后每隔2d换液一次，12-14d后终止培养。2.根据权利要求1所述的一种表皮细胞的扩增制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中表皮细胞培养液包括基础培养液以及胰岛素8-12μg/mL，转铁蛋白0.5-1μg/mL，生长激素5μg/mL...