3、灰色链丝菌酶 ：由灰色链丝菌提取的一种酶制剂，是蛋白酶、氨肽酶和羧肽酶的混合物。
胎牛血清、新生犊牛血清、成年牛血清、马血清、鸡血清、兔血清、羊血清、人血清，其中以 新生犊牛血清使用最为广泛。
3）加入生长液,反复吹打几次，使细胞分散成单个细胞，然后分装于3个小瓶中。再在每个小瓶中 补充生长液至10ml，然后置37T培养箱培养，培养1-2天即可长成单层。
4、取出瓶子，倒掉或不倒掉培养液，补足维持液，置温箱中继续培养，直至80沖上的细胞病变5、收毒：将病变的细胞置于-20C冰箱中，冻结后取出自然解冻，在解冻过程中振摇几次，以使细 胞完全从瓶壁上脱落。然后将病毒液收集于盐水瓶或其它容器中。低温贮藏备用。
7、 取出，静置几分钟，小心吸弃上层胰酶溶液，用DME轻洗2次后，加入生长液5ml，用大口径 吸管反复吹打，使细胞游离。
1、胰酶 使精氨酸或赖氨酸的羧基和其他氨基酸的氨基之间的多肽链发生水解，导致细胞间质水 解而使细胞或组织块消化为分散的单个细胞。
5、 将剪碎的组织块倒入锥形瓶或烧杯或大青霉素瓶中，用DME充分冲洗，并静置几分钟，待组织 块下沉，吸弃上层液体，再加DMEM如此反复冲洗2-3遍。
6于沉淀组织块内加入约4倍量的0.25%胰酶，并调pH至7.6-7.8，振荡混匀后置37C水浴中感 作30分钟，每10分钟轻轻摇动一次，使细胞消化完全（组织块变散松，沉降渐变缓慢时即表 示消化足够）。
2、无菌操作下用剪子去除气室部卵壳，去除壳膜，穿破绒毛尿囊膜，夹住鸡胚颈部，取出鸡胚放 于灭菌平皿中。
了解倒置显微镜的构造与使用，了解不同传代细胞的形态及接毒后的病变特征, 代培养方法、病毒接种方法及收毒方法。
A、血清中存在不少有害于细胞生长和繁殖的物质：补体、免疫球蛋白、生长抑制因子。
4、 生长Байду номын сангаас：含10%犊牛血清、200U/ml青、链霉素的DMEM
2） 加入2ml胰酶消化液，于37C培养箱放置几分钟，至细胞间出现空隙或细胞变圆后，倒去消化 液。
于培养后每天观察结果，至长层单层。细胞量较大时，一天即可长成单层，细胞呈纤维状
了解病毒感染力测定的几种常用方法，掌握半数细胞培养物感染量TCID5o的操作步骤、计算方 法及含义。
10、将计数好的细胞稀释到合适的浓度，使细胞量约为4-6x106个/ml，分层于细胞培养瓶中，每
瓶1ml，再补加DME生长液至10ml，盖上星空体育登录入口 星空体育在线官网盖子，置于37C恒温箱中培养。