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　　c、个别扩增曲线突然骤降：反应管内留有气泡，由于温度升高后气泡破裂，使仪器检测到的荧光值突然降低所致。进行扩增反应之前要仔细检星空体育登录入口 星空体育在线官网查反应管内是否有气泡残留。

　　a、反应循环数不够：一般设置循环数为40，但需要注意的是过多的循环会增加过多的背景信号，降低数据可星空体育登录入口 星空体育在线官网信度。b、确认程序中是否设置了信号采集步骤：

　　两步法扩增程序一般将信号采集设置在退火延伸阶段；三步法扩增程序应当将信号采集设置在

　　d、模板浓度太低：减少稀释度重复实验，一般未知浓度的样品先从最高浓度做起。e

　　①重新设计引物。②若杂峰为引物二聚体，可尝试提高模板浓度、退火温度或者降低引物浓度进行改善。