那些令人犯晕的PCR异常曲线这里都讲了！（附解决方案）
每一个荧光定量 PCR（qPCR）人都有一部科研血泪史，其中，曲线异常令许多科研小白头疼不已。
一般而言，qPCR 曲线异常问题通常分为两大类：扩增曲线异常、融解曲线异常。今天，将为大家总结星空体育登录入口 星空体育在线官网曲线异常原因 & 解决方案。
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一是扩增信号太弱，经系统矫正后产生斜线，二是仪器本身的问题，可能在扩增过程中仪器出现了波动或者本身该检测孔出现了异常。
主要原因是模板浓度过高，在基线期内就起峰了，仪器默认起峰的线条仍为基线部分，进而将扩增曲线往基线位置下拉。
针对这类情况，可以减小基线 个循环），重新分析数据，一般都能得到一个比较好的结果。
这是比较常见的一个问题，反应管内若留有气泡，温度升高后会导致气泡破裂，使仪器检测到的荧光值突然降低。
小伙伴们可以尝试去掉 ROX 分析数据，检查下重复性是否良好（即复孔间 STD0.2），倘若此方法不行，则需要在下次实验注意千万不能加错 ROX！
杂峰为引物二聚体，引物二聚体主要是由于体系内引物与引物纠缠比引物与模板结合更容易导致的，可以尝试提高模板浓度、退火温度或者降低引物浓度来进行改善；
大家可以先增加退火温度再试试看，如果没有改善，那么就需要重新更换引物啦。
看了上述 qPCR 曲线异常的原因，小伙伴们心中是否有底了呢？除此之外，这里还给大家额外总结了一波高频实验问答，从他人的实验问题中也能学到更多宝贵的经验哦~
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