师兄,我太难了!辛苦一周的 qPCR 溶解曲线被老师嫌弃「丑」爆了! 我该怎么办?

师兄:溶解曲线异常见现象有出现双峰、杂峰以及 NCT 起峰等等,先看看你的数据和曲线特征,针对问题,对症下药!
除了熔解曲线,RNA 降解、扩增曲线杂乱、扩增无法到达平台期、复孔重复性差、CT 值异常等问题也是层出不穷,但种种问题都不能一概而论,对症下药最重要。
如果你也有以上 qPCR 实验问题,别慌!为了让大家少走弯路,11 月 15 日 19:00赛默飞联合丁香园开展 qPCR 专题直播课程,围绕「从入门到精通,qPCR 疑难、技巧轻松搞定」,全方位剖析 qPCR 实验技巧、并有常见问题解析和案例分享,帮助大家实现实验进阶,得到理想曲线和数据。
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引物设计跨内含子(防止非特异性扩增),注意不同转录本之间的差异,扩增效率在 90~110% 之间,引物特异性验证(Primer-Blast 序列比对及溶解曲线. CT 值异常分析:
Ct 值过大:可能是模板浓度低,扩增效率低或者体系存在 PCR 抑制物。应注星空体育网站 星空体育首页意提高模板浓度,降低退火温度等优化反应程序。
现场还有一对一答疑、有机会赢取美的暖风机、膳魔师不锈钢真空保温杯、小米电吹风、不锈钢指甲套装、帆布包等 120 份好礼!

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