CCK8试剂颜色为淡红色，与含酚红培养基颜色接近，不注意话容易产生漏加或多加。
CCK-8在0-5℃下可以保存至少6个月，在-20℃下避光可以保存1年。
当在培养箱内培养时，培养板最外一圈孔最容易干燥挥发，由于体积不精确而增长误差。普通状况下，最外一圈孔只加培养基，不作为测定孔用。
在培养基中加入CCK8，培养一定期间，测定450 nm吸光度即为空白对照。在做加药实验时，还应考虑药物吸取，可在加入药物培养基中加入CCK8，培养一定期间，测定450 nm吸光度作为空白对照。
5、培养1-4小时:细胞种类不同，形成Formazan量也不同样。如果显色不够话，可以继续培养，以确认最佳条件。特别是血液细胞形成Formazan很少，需要较长显色时间（5-6小时）。
6、测定450nm吸光度：建议采用双波长进行测定，检测波长450-490nm，参比波长600-650nm。
Cell Counting Kit-8（简称CCK-8）试剂可用于简便而精确细胞增殖和毒性分析。其基本原理为：该试剂中具有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）作用下被细胞中脱氢酶还原为具备高度水溶性黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成甲瓒物数量与活细胞数量成正比。因而可运用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。
6、加入10ul CCK8：由于每孔加入CCK8量比较少，有也许因试剂沾在孔壁上而带来误差，建议在加完试剂后轻轻敲击培养板以协助混匀。
7、培养1-4小时:细胞种类不同，形成Formazan量也不同样。如果显色不够话，可以继续培养，以确认最佳条件。特别是血液细胞形成Formazan很少，需要较长显色时间（5-6小时）。
2、接种到96孔板中：依照适当铺板细胞数，每孔约100ul细胞悬液，同样样本可做3个重复。
3、37℃培养箱中培养：细胞接种后贴壁大概需要培养2-4小时，如果不需要贴壁，这步可以省去。
5、37℃培养箱中培养：加入毒性物质培养时间，要看毒性物质性质和细胞敏感性，普通要依照细胞周期来决定，起码要一代以上时间。
8、测定450nm吸光度：建议采用双波星空体育 星空体育平台长进行测定，检测波长450-490nm，参比波长600-650nm。
若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1MHCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。
如果待测物质有氧化性或还原性线之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新培养基），去掉药物影响。固然药物影响比较小状况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后空白吸取即可。
2、接种到96孔板中：依照适当铺板细胞数，每孔约100ul细胞悬液，同样样本可做3个重复。
3、37℃培养箱中培养：细胞接种后贴壁大概需要培养2-4小时，如果不需要贴壁，这步可以省去。
4、加入10ul CCK8：由于每孔加入CCK8量比较少，有也许因试剂沾在孔壁上而带来误差，建议在加完试剂后轻轻敲击培养板以协助混匀。或者直接配备含10%CCK8培养基，以换液形式加入。
当使用原则96孔板时，贴壁细胞最小接种量至少为1,000个/孔(100 μl培养基)。检测白细胞时敏捷度相对较低，因而推荐接种量不低于2,500个/孔(100 μl培养基)。
酚红和血清对CC星空体育 星空体育平台K8法检测不会导致干扰，可以通过扣除空白孔中本底吸光度而消去。
CCK8可以检测大肠杆菌，但不能检测酵母细胞。在细胞增殖实验每次测定过程中需要避免细菌污染，以免影响成果。
金属对CCK-8显色有影响：当终浓度为1 mM氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会抑制5%、15%、90%显色反映，使敏捷度降级。如果终浓度是10 mM线%抑制。